摘要：通過對奶牛飼喂生化黃腐酸試驗，研究其對奶牛生產性能、血液生化指標及體細胞計數的影響，進一步研究奶牛乳房炎的抗病力。選擇50頭泌乳奶牛，進行分組試驗。結果表明，添加生化黃腐酸的試驗組奶牛的產奶量較對照組提高了5.99%,乳脂率提高8.50%,體細胞數下降了40.09%，蛋白率變化不明顯；奶牛血清中SOD含量提高了3.6%，GSH-PX含量提高了7.72%，LDH含量降低9.3%，MDA變化不明顯，奶牛白細胞維持正常，兩組各項指標差異均不顯著（p＞0.05）。綜合指標分析表明：飼喂生化黃腐酸具有提高奶牛泌乳性能，減少奶牛體細胞計數，增強機體抗病力的效果。
關鍵詞：生化黃腐酸；奶牛；體細胞數；生產性能；生化指標
Study on the Effect of Biochemical Fulvic Acid on Somatic cell count
and Milk Performance of Dairy Cow
Sun shao-hua Han li-xia(College of Animal Science and Technology, Agricultural University of Hebei, Baoding, 071001.)
Abstract: Study to feed biochemical fulvic acid(BFA) influence milk performance,blood biochemical indicators , somatic ceel count and mastitis resistibility of dairy cows .Selectting 50 lactation cows were divided into test group and control group. Research results showed that milk yield , milk fat percentage and SOD ,GSH-PX content in serum for dairy cow of BFA test group were increased 5.99% , 8.50%
3.6% and 7.72% respectively than the control group.Somatic cell count, LDH content in serum for dairy cow of BFA test group dropped
40.09% and 9.3% respectively than control group. Milk protein percentage , MDA content in serum and WBC of blood for dairy cow of BFA test group did not change significantly. The all test index are not significantly different (p> 0.05). The experiment of feeding BFA for dairy cows showed that BFA enhance the body resistance and milk performance.
Key words: Biochemical fulvic acid; Dairy cows; Somatic cell count; Performance; Biochemical indicators
前言
乳房炎是危害奶牛業健康發展的重要疾病，每年臨床性乳房炎發病率為15%~20%，隱性乳房炎發病率為46%~85.7%，不僅造成產奶量降低4%~20%，而且鮮乳品質大大下降，美國每年每頭乳房炎損失225美元，中國約為1200~3600元。由于隱性乳房炎難以發現，使牛場造成的經濟損失更難以估計[1]【2】。因此，預防和治療乳房炎就成為當前奶牛場的重要工作。乳中體細胞計數（Somatic cell count，SCC）是反映乳房是否炎癥（包括隱性乳房炎）的一個重要指標，乳房感染程度越高，乳中體細胞數越多。據研究，臨床性乳房炎與SCC呈高度相關性（r=0.5~0.7） [3] [4]。因此各國把測定奶牛體細胞數作為奶牛乳房炎抗性的選擇性狀和監測指標。國際奶牛聯合會規定：SCC在20-40萬為隱型乳房炎，50萬以上為臨床型乳房炎。據報道奶牛日產奶量與隱性乳房炎發病程度呈極顯著負相關[4]。乳汁中體細胞數越高,泌乳量減少的越多。
乳房炎傳統的治療方法主要使用抗生素等藥物,其結果不僅因藥物殘留造成鮮乳的廢棄，而且長時間使用抗生素類藥物會使奶牛產生抗藥性，影響藥效。因此，一種預防和治療乳房炎，且無藥物殘留的生態型制劑，生化黃腐酸也就應運而生了。
生化黃腐酸（Biochemical Fulvic Acid,BFA）是一種有機物經微生物發酵而產生的大分子聚合物，內含多種具有生物活性的抗病因子及氨基酸、維生素等營養物質。其生物活性具有消炎、止血、收斂、抗過敏、調整胃腸機能、增強機體免疫能力的功效，日糧中少量添加有防病保健及增產作用[5]。孫少華等[6]發現利用生化黃腐酸添加劑治療奶牛乳房炎，治愈率達80%以上；張螢蕾等[7]也報道了日糧中添加生化黃腐酸BFA粉可顯著降低臨床乳房炎發病率及隱性乳房炎檢出率,從而提高奶牛產奶量,可提高牛奶品質,降低治療費用,增加效益。谷子林等[8]進行的試驗表明,生化黃腐酸可提高機體的非特異性免疫力,增加白細胞數量和吞噬細胞活性,同時具有止血和收斂作用。本實驗通過給泌乳期奶牛添加生化黃腐酸，研究其對奶牛體細胞數和生產性能以及血液生化指標的影響,進而達到降低體細胞數、預防乳房炎，提高生產性能的目的。
1實驗材料和方法
1.1
試驗地點和時間
試驗地點設在唐山市蘆臺天成奶牛場，試驗時間為2008年3月8日至5月10日，試驗期為兩個月。
1.2試驗牛的選擇和分組
唐山蘆臺天成奶牛場選擇50頭泌乳前中期的健康荷斯坦牛，根據產奶量，體細胞數，胎次和泌乳天數等相近的原則分為試驗組和對照組，每組25頭。實驗前進行T檢驗，各項指標差異不顯著后進行試驗。
1.3
飼養管理
唐山蘆臺天成奶牛場飼喂全價混合標準日糧，由TMR機械投喂，日投3次、擠奶3次，生化黃腐酸分2次添加到早晚飼喂的奶牛全混合日糧中，每頭每天15克。
1.4
血樣、乳樣的采集與測定
試驗奶牛均采用擠奶機擠奶，試驗期每月定期采集一次乳樣送河北省良種站DHI測定中心進行DHI分析，測定乳脂率，乳蛋白率和乳中的體細胞數。試驗期前和試驗期后每頭奶牛各采集一次血樣，分離血清，用于奶牛血液生理生化指標測定。
1.5
試驗材料
1.5.1
生化黃腐酸粉劑由深州綠源牧業公司提供。
1.5.2
生化分析試劑盒：超氧化物歧化酶（SOD）測試盒、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）測試盒、乳酸脫氫酶（LDH）測試盒和丙二醛（MDA）測試盒及測定方法均由南京建成生物工程研究所提供。
1.5.2血常規及白細胞數均由河北大學附屬醫院分析測定
1.6
統計分析
在數據處理過程中采用了通用的產犢季節劃分標準和泌乳階段劃分標準[9]。
產犢季節
| 水平
| 泌乳階段
| 水平
| 春（3、4、5）
| 1
| 前期（0～15）
| 1
| 夏（6、7、8）
| 2
| 盛期（16～100）
| 2
| 秋（9、10、11）
| 3
| 中期（101～200）
| 3
| 冬（12、1、2）
| 4
| 后期（201～305）
| 4
|
|
| 305天以上——
| 5
|
為了消除胎次、產犢季節、泌乳階段對產奶量、乳成分及體細胞計數的影響，構建了最小二乘線性模型[10][11]。其線性模型為：
Y =µ + z + t + c + m +e
其中Y-各性狀的觀察值；µ-各性狀最小二乘均值；z-試驗分組效應； t-胎次效應；
c-產犢季節效應；m-泌乳階段效應；e－殘差效應。
應用Excel對所測數據進行T檢驗和利用SAS軟件對所測數據做最小二乘法分析。
2
結果與分析
2.1
生化黃腐酸對奶牛產奶量、乳成分及體細胞數的影響
表2 天成奶牛場奶牛產奶量及體細胞數最小二乘均值及差異顯著性檢驗 | | | | | | | | | | | | | 34.58±2.33
| 26.89±2.44
| | | 43.65±16.9
| 18.23±9.1
| | | | 35.95±2.56
| 25.37±2.35
| | | 39.78±18.5
| 30.43±8.8
| | | | | | | | | | | | | | | | | | 1.16
| | | | | | | | | | | |
從表2可以看出，試驗前后的兩組奶牛產奶量均下降，且差異均顯著（p＜0.05）。其中試驗組測定日下降7.69kg/頭，對照組下降10.58kg/頭，試驗組下降較對照組下降緩慢，少下降2.89kg/頭日。在試驗后比較，試驗組平均產奶量比對照組提高1.52kg/頭日，提高了5.99%,但差異不顯著（p＞0.05）；試驗組體細胞數比對照組減少了12.2萬個/ml,但差異不顯著（p＞0.05）。與試驗前比較，試驗組和對照組的體細胞數均有所下降，試驗組下降25.4萬個/ml（p＜0.05）,對照組下降9.35萬個/ml（p＞0.05）,但試驗組較對照組下降明顯，多減少體細胞數為16.05萬/ml。
表3
天成奶牛場奶牛乳成分最小二乘均值及差異顯著性檢驗
從表3中可以看出，在試驗后，試驗組測定日乳脂率較對照組增加0.35個百分點,提高了 11.9%，差異不顯著（p＞0.05）；試驗組乳蛋白率較對照組增加0.06個百分點，提高了1.97%，差異不顯著（p＞0.05）。與試驗前對比，試驗組乳脂率升高了0.14個百分點（p＜0.05），而對照組降低了0.18個百分點，即試驗組相對提高了0.32個百分點；乳蛋白率試驗前后對比，兩組均同步有所下降，但差異不顯著（p＞0.05）。
2.2生化黃腐酸對奶牛血液生化指標的影響
2.2.1唐山蘆臺天成奶牛場生化黃腐酸對奶牛血液生化指標的影響
項目
| 試驗組（25）
| 對照組（25）
| P值（t檢驗）
| 白細胞WBA（U/L）
| 8.8±1.23
| 12.4±2.65
| 0．06
| 超氧化物歧化酶SOD（U/mL）
| 133.69±19.49
| 129.1±21.33
| 0．23
| 谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX（U/L）
| 395.23±175.35
| 366.90±184.56
| 0．30
| 乳酸脫氫酶LDH（U/L）
| 3908.46±1341.94
| 4306.97±2753.16
| 0．12
| 丙二醛MDA
(mmol/ml)
| 4.42±2.18
| 3.79±1.65
| 0．14
|
注：試驗組對照組各25頭
從表4可以看出，唐山蘆臺天成奶牛場試驗組奶牛血清中SOD含量比對照組提高了3.60%，GSH-PX含量提高了7.72%，奶牛血清中LDH比對照組降低了9.3%，MDA有所提高，但差異均不顯著（p＞0.05）；生化黃腐酸并且能使奶牛白細胞維持在正常的范圍內。
3
效益分析
表2和表3分析結果表明，添加生化黃腐酸后，試驗組比對照組每頭奶牛平均每天增產1.52千克，平均乳脂率提高0.35個百分點,平均蛋白率提高0.07個百分點，體細胞數減少12.2萬個/ml，達到國家一級鮮奶的要求。若按現在市場鮮奶價格每千克2.8元，生化黃腐酸每頭奶牛每天投入0.66元（＝15克/頭日×0.44元/克）計算，則每頭牛每日凈增加收入為3.596元（＝1.52kg×2.8元/kg－0.66元/日），若按泌乳期305天計算，一個泌乳期每頭牛僅因產奶量增加就可多增收1096.78元，經濟效益十分顯著。另外通過添加生化黃腐酸，降低了奶牛因乳房炎的淘汰率，延長了奶牛的利用年限，降低了生產成本。
4
討論
4.1利用最小二乘線性模型剔除系統環境效應
本試驗利用最小二乘分析法，對奶牛的胎次、泌乳階段和產犢季節進行了校正，剔除了系統環境效應的影響，使奶牛產奶量、乳脂率、乳蛋白率和體細胞數值準確、可靠，達到了最佳線性無偏估計。
4.2生化黃腐酸對奶牛產奶量和乳成分的影響
從表2和表3可以看出，添加生化黃腐酸后試驗組奶牛的平均產奶量較對照組每天上升了1.52kg/頭，并且乳脂率、乳蛋白率較對照組也有所升高，這與高靜、吳子申等[12]報道的奶牛投喂生化黃腐酸后平均產奶量，乳脂率提高變化趨勢基本一致。通過試驗前后奶牛產奶量的對比分析還可以看出，由于接近夏季且到泌乳后期，雖然試驗組和對照組產奶量均有所下降，但試驗組奶牛平均產奶量較對照組下降緩慢，少下降2.89千克，證明了生化黃腐酸對于維持奶牛的高產性能也有重要作用。
另外，為了保證試驗結果的準確性，我們還對蘆臺天成奶牛場飼喂生化黃腐酸的大牛群與未飼喂的大牛群共82頭（試驗群38頭，對照群44頭）進行了DHI數據資料分析（試驗前各項指標檢驗差異均不顯著（p＞0.05））。大群的試驗前后對比說明試驗結果變化趨勢同小組試驗結果一致，測定日產奶量試驗群比對照群少下降0.78千克（試驗群－6.94kg，對照群－7.72kg），試驗群的乳脂率和乳蛋白率較試驗前分別提高了0.54和0.07個百分點，而對照群乳脂率則下降0.25個百分點，乳蛋白率未變。試驗后，試驗群乳脂率和乳蛋白率較對照群分別提高0.47（3.26%-2.79%；P﹤0.05）和0.04（3.10%－3.06%；P＞0.05）。進一步證明了生化黃腐酸具有提高奶牛產乳量和乳質量的作用。
4.3生化黃腐酸對奶牛體細胞數及乳房炎的影響
抗病力通過表2可以明顯的看到投喂生化黃腐酸后，試驗組奶牛的體細胞數明顯低于對照組12.2萬，并且維持在18.2萬的較低水平，達到國家一級奶的要求。在同一牛場的大群82頭試驗也同樣說明了試驗群比對照群體細胞數少43.73萬/ml（33.26－76.99），且對照群患乳房炎牛頭數增多，也進一步證明生化黃腐酸有減少奶牛體細胞數，降低乳房炎發病率的功效。
4．4生化黃腐酸對奶牛免疫力的影響
從表4看出，投喂生化黃腐酸后，奶牛血清中的SOD、GSH-PX有所升高，LDH下降、MDA有升高。另外我們在保定宏康奶牛場對26頭奶牛飼喂生化黃腐酸的進一步試驗證明，其結果同蘆臺牛場一致，試驗組奶牛血清中SOD、GSH-PX比對照組分別提高1.7％(153.74:151.23)和1.53％(357.28:351.91),MDA下降22.7％（1.50：1.94），但差異不顯著（p＞0.05）。說明奶牛主要通過提高SOD、GSH-PX酶的抗氧化活性來及時消除體內過剩自由基對機體組織的危害[13]。并且據生化黃腐酸的體外抗菌實驗研究表明生化黃腐酸在體外不能殺菌,但內服卻具有抗菌作用,而且無任何副作用[14]。其主要是誘導機體產生干擾素，激活網狀內皮系統增強非特異性免疫，對病原微生物產生強大抵抗力。說明生化黃腐酸對奶牛維持正常的生理機能和增強免疫力有重要作用。
致謝：河北省良種工作站倪俊卿副主任和馬亞濱提供奶牛DHI數據，蘆臺天成奶牛場劉煥君場長幫助飼養試驗。
參考文獻：
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附錄
1.供試?；厩闆r見表1，2。
項目
| 平均胎次
| 平均泌乳天數
| 平均產奶量
| 平均乳脂率
| SCC（萬個/ml）
| 試驗組（25）
| 3.28±1.43
| 158.2±52.7
| 34.58±2.33
| 3.15±0.23
| 43.65±16.9
| 對照組（25）
| 3.04±1.06
| 165.5±50.6
| 35.95±2.56
| 3.12±0.25
| 39.78±18.5
| P值
| 0．25
| 0．31
| 0．60
| 0．79
| 0．95
|
注：括號內為牛頭數
項目
| 平均胎次
| 平均泌乳天數
| 平均產奶量
| 平均乳脂率
| SCC（萬個/ml）
| 試驗組（13）
| 1.92±0.75
| 150.7±72.6
| 14.70±5.42
| 4.22±0.91
| 51.4±54.7
| 對照組（13）
|
1．92±1.03
| 150.4±73.3
| 13.15±5.48
| 4.25±1.36
| 50.2±59.0
| P值
| 0．37
| 0．24
| 0．21
| 0．18
| 0．65
|
注：括號內為牛頭數
2.大群分析比較
表3 天成奶牛場大群牛產奶量及體細胞數LSM值及顯著性檢驗
表4
天成奶牛場大群奶牛乳成分LSM值及差異顯著性檢驗
3.
保定宏康奶牛場生化黃腐酸對奶牛血液生化指標的影響
項目
| 試驗組（13）
| 對照組（13）
| P值
| 白細胞WBA（U/L）
| 7.28±1.95
| 6.8±1.50
| 0．26
| 超氧化物歧化酶SOD SOD（U/mL）
| 153.74±16.65
| 151.23±20.27
| 0．34
| 谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX（U/L）
| 357.28±30.96
| 351.91±44.50
| 0．36
| MDA
(mmol/ml)
| 1.50±1.11
| 1.94±1.47
| 0．20
|
注：試驗組對照組各13頭
* 通訊作者：孫少華 博士 教授，博士生導師，研究方向：牛生產學，動物遺傳育種學，Tel:0312-7528453,Email:shaohuasun@sina.com |
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發表于 2009-3-6 23:20:55
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