輔酶Q10（coenzyme Q10，CoQ10）廣泛存在于線粒體內膜中，是細胞代謝的激活劑。臨床上輔酶Q10 主要用于治療心血管疾病 [1]，對其他多種疾病也有輔助療效，目前有片劑、膠囊、軟膠囊、注射劑等多種劑型。因輔酶Q10 極不溶于水，當前上市的輔酶Q10 注射劑穩(wěn)定性較差，輔酶Q10 極易析出，有待于改進劑型。脂質體可增強藥物的穩(wěn)定性，且對缺血心肌、肝臟等組織具有被動靶向性。國內有輔酶Q10 脂質體質量評價的報道[2]，但較為籠統，作者制備了輔酶Q10 脂質體，較系統的研究了其穩(wěn)定性，并采用新方法測定了輔酶Q10 脂質體包封率。 

　　1 儀器與藥品 

　　1.1 儀器 

　　集熱式恒溫磁力攪拌器（浙江省樂成電器廠）；Lipex–Extruder 擠出儀（Northern 公司）；微孔濾膜（上海亞東分離器材廠）；HPLC 色譜儀（Waters 公司）；PHS–2C 型精密酸度計（上海雷磁儀器廠）；GAST 真空泵（MFG 公司）。 

　　1.2 藥品 

　　輔酶Q10（沈陽濟世制藥公司）；注射用豆磷脂 (上海太偉藥業(yè))；膽固醇（天津博迪化工有限公司）；無水乙醇為色譜純，其他試劑為分析純。 

　　2 方法與結果 

　　2.1 輔酶Q10 脂質體的制備 

　　2.1.1 乙醇注入法制備輔酶Q10 脂質體 

　　精密稱取一定量的輔酶Q10 及一定質量比的磷脂和膽固醇，以2 mL 無水乙醇溶解，快速均勻注入到pH=7.0 的磷酸鹽緩沖液10 mL 中，60 ℃下攪拌并減壓蒸發(fā)除去乙醇，即得輔酶Q10 脂質體混懸液。 

　　2.1.2 擠出法分離游離藥物 

　　參考文獻[3]，將制得的脂質體混懸液在0.5 MPa、室溫條件下過0.45 m 微孔濾膜，擠出3 遍。 

　　未包封的游離藥物殘留在膜上，通過膜的脂質體混懸液為脂質體成品。 

　　2.2 包封率及含藥量測定 

　　輔酶Q10 脂質體成品經濾膜過濾分離后，本文作者采用高效液相檢測方法對輔酶Q10 脂質體的包封率進行了測定。首先，將脂質體成品在0.5 MPa、室溫條件下過0.22 　m 微孔濾膜。過膜前與過膜后脂質體混懸液中藥物量分別為總藥物含量和包封于脂質體中的藥物量，將過膜前與過膜后的脂質體混懸液用流動相稀釋相同倍數。然后，用HPLC 測定3 次，按E (%)=ρ2/ρ1×100%計算包封率。色譜條件為色譜柱：Kromasil ODS 柱（250 mm×4.6 mm，5 m，大連）；流動相：甲醇-無水乙醇（V:V=1:9）；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL·min-1；紫外檢測波長：275 nm；進樣量：20 L；外標法。輔酶Q10 質量濃度在0~35 g·mL-1 內呈良好線性關系。 

　　輔酶Q10 脂質體成品的含藥量按上述色譜條件同法測定3 次。經測定輔酶Q10 脂質體中平均藥物含量為1.93±0.07 mg·mL-1，輔酶Q10 脂質體成品包封率為99.2%±0.8%。 

　　2.3 過氧化值的測定 

　　精密吸取脂質體1 mL，置10 mL 具塞離心試管中，加入TTH 試液（取三氯醋酸（TCA）30 g、硫　代巴比妥酸（TBA）0.75 g，加0.25 mol·L-1 的鹽酸200 mL，溫熱至溶，放冷后過濾）5 mL，混勻密閉，置100 ℃水浴中加熱30 min。放冷后再加TTH 試液4 mL，混勻后以4 000 r·min-1 離心10 min。取上清液，以TTH 試液為空白，測定532 nm 處的吸光度A，記作過氧化值[4]。 

　　2.4 外觀色澤 

　　觀察輔酶Q10 脂質體成品的外觀及顏色變化。評定標準：淡黃色，不絮凝（――）；白色，不絮凝（＋－）；淡黃色，絮凝（＋－）；白色，絮凝（＋＋）。 

　　2.5 穩(wěn)定性考察 

　　2.4.1 光照影響 

　　取適量輔酶Q10 脂質體成品，裝于密封小瓶中，置1 000 Lx 條件下照射10 d，于第0、1、3、5、10 d 取樣，考察藥物含量、包封率、過氧化值、pH 值等項目（見表1）。結果表明，輔酶Q10 脂質體對光很不穩(wěn)定，應避光保存。 

　　2.4.2 溫度影響 

　　取適量輔酶Q10 脂質體成品，裝于密封小瓶中，分別置于25、40、60 ℃水浴中，放置10 d，定時取樣，考察穩(wěn)定性（見表2~4）。結果表明，輔酶Q10 脂質體在25℃和40℃的條件下比較穩(wěn)定，在60℃下較不穩(wěn)定。 

　　3 討論 

　　輔酶Q10 原料藥遇光易分解，較不穩(wěn)定，在光照條件下藥物含量下降明顯。實驗過程中應盡量避光操作。制得的輔酶Q10 脂質體在光照條件下也很不穩(wěn)定，應避光保存。磷脂中含有不飽和脂肪酸鏈，容易被氧化和水解。磷脂水解產物最主要的是脂肪酸，可使溶液pH 值下降。但穩(wěn)定性考察中pH 值變化不大，可能是由于制劑中磷脂濃度較低，而且磷酸鹽緩沖液的存在，使pH 變化不明顯。磷脂的降解產物主要是過氧化物、丙二醛等，其中丙二醛能與硫代巴比妥酸反應生成一種紅色物質，在532 nm 處有最大吸收，可根據吸光度的大小來反應磷脂的氧化程度。由于丙二醛不穩(wěn)定，在高溫和強光條件下會進一步分解，因此在穩(wěn)定性加速實驗中脂質體混懸液的過氧化值出現了先增加后降低的現象。隨著溫度的升高，輔酶Q10 脂質體的穩(wěn)定性有所下降，因此制劑應在常溫或低溫下保存。制備的輔酶Q10 脂質體工藝簡單、質量可控，在室溫和避光條件下，可長期放置，性質穩(wěn)定。